紅細胞微核計數(shù)使用的方法步驟
更新時間:2023-05-12 文章更新于2023-05-12 點擊次數(shù):989次
紅細胞微核計數(shù)(RedBloodCellMicronucleusTest,RBCMNTest)是一種常見的體外細胞毒性測試方法,用于評估化學物質(zhì)、藥物或其他化合物對人體血液系統(tǒng)的毒性效應。微核是由于DNA損傷而形成的小型胞核,通常發(fā)生在有絲分裂期間。正常情況下,當一次有絲分裂結(jié)束后,胞核會重新組合和分配到兩個新的細胞中;然而,當DNA損傷發(fā)生時,細胞無法完成DNA修復并重新組合胞核。這時,新細胞中就會形成一個或多個額外的小型胞核,即微核。因此,觀察微核數(shù)量變化可以比較敏感地反映DNA的損傷程度。
紅細胞微核計數(shù)方法步驟:
1.準備樣本:收集靜脈血,避免使用抗凝劑,并將樣本盡快送到實驗室進行處理。
2.處理樣本:將血液加入適量的培養(yǎng)基,使其接觸到不同濃度的測試物質(zhì),通常為化學物質(zhì)或藥物。處理后,在不同時間點采集血標本。
3.制備細胞涂片:將血液沉淀在載玻片上,然后固定、染色并顯微鏡下觀察到底是否有微核。
4.計算微核數(shù)目:在顯微鏡下計算每個細胞的總個數(shù)和微核的數(shù)量。最終,計算出微核率(micronucleusfrequency,MNF)或微核指數(shù)(micronucleusindex,MNI)對測試物質(zhì)的毒性進行評估。
優(yōu)點:
1.反映DNA損傷敏感、準確程度高。
2.實驗操作簡單、重復性好、成本低。
3.早期發(fā)現(xiàn)化學物質(zhì)、藥物或其他化合物的毒性效應,有效保護人類健康。
紅細胞微核計數(shù)是一種常用的體外細胞毒性測試方法,可以準確反映DNA損傷程度,廣泛應用于化學物質(zhì)和藥物等對人類健康的毒性評估。然而,該方法也存在一些缺點和局限性,需要在實際應用過程中認真分析和考慮。為了更好地保護人類健康,需要不斷完善和改進技術(shù),提高其靈敏度和可靠性。
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